摘要：结果表明：苹果褐斑病的分生孢子在5℃～30℃之间均可萌发，最适萌发温度为25℃，但在30℃和5℃时，分生孢子的萌发萌发率很低；25℃下处理4.5h分生孢子即可萌发，温度在25℃以上萌发所需时间随温度的升高而变短，低于25℃分生孢子的萌发率随温度的升高所需的时间越短；测得其24h时的芽管长度在20℃时是最长的。由此推出温湿度对苹果褐斑病的发生起着重要的作用。
关键词：苹果褐斑病 分生孢子 温度 湿度 萌发
苹果褐斑病（Marssonina coronaria）又称绿缘褐斑是引起早期落叶的主要病害，苹果褐斑病在我国各苹果产区都有发生。为害严重时，常造成苹果树早期大量落叶[1]，削弱树势，果实不能正常成熟，影响花芽分化和产量。对花芽形成和果品产量、质量都有明显影响。
苹果褐斑病主要侵染叶片，也可为害果实和叶柄[2]。褐斑病的发病顺序为，接近地面的叶片→内堂基部叶片→内堂叶片→树冠外围叶片[3]。3种病斑都使叶部变黄，但病斑边缘仍保持绿色，形成绿色晕圈，而且病叶易早期脱落，尤其是风雨以后叶常大量脱落[4]。
因此研究温等主要气候条件对褐斑病分生孢子萌发的影响及发生规律，找出最适的防治时机，进行侵染预测，以便，找出适当的防治时机，制定出相应的防治措施，为生产防治提供一定的理论依据。
1、具体方法和步骤
1.1 菌种的来源及实验用分生孢子的获得
（1）实验用菌种。09年青岛农业大学温室苹果苗感病的叶片以及青岛农业大学试验果园内感病的叶片进行保湿所得的新生分生孢子。温湿度控制：试验所设温度由智能光照培养箱（MGC250BP2，上海一恒公司）和低温培养箱（LRH250CL）控制，恒温波动±1.0℃。培养箱在使用前用HOBO Pro温度记录仪（美国产，温度精度±0.2℃）校正。每次试验重复，恒温箱随机重排，消除由仪器本身导致的系统误差。
（2）实验分生孢子的获得。为保证孢子的一致性，尽量降低孢子本身的影响。试验所用菌种均是采新鲜发病叶片经过用喷壶喷去老的孢子处理后，并在保鲜盒里在25℃保湿48小时后，在发病部位会出现白色或淡黄色孢子角。用喷壶喷叶面的孢子角制成悬浮液，悬浮液浓度为1×105个/mL。结果发现：复合型的病斑叶片易于产生分生孢子角。实验一共重复了六次，但中间有两次出现不明原因的误差，孢子萌发率很低，所以只取了其中四次较好的结果。
1.2 温度对苹果褐斑病菌分生孢子萌发率的影响
实验处理。实验设6个温度处理，5个湿度处理，共30个组合。6 个温度处理为5℃、10℃、15℃、20℃、25℃和30℃，处理的时间均为24h。
2、结果与分析
不同温度、不同时间测孢子萌发率及24h各温度芽管的长度测定的试验结果。
（1）不同温度、不同时间测孢子萌发率的结果和分析。
根据实验数据按逻辑斯蒂模型进行线性拟合SAS分析，其曲线方程为
Y=K/（1+exp（-β×（t-M））[7]其分析结果如下表：
K—萌发率的最大趋近值 β—萌发速率 M—萌发速率达到K/2时所用的时间 R2—决定系数（模型能解释的变异度占总变异度的百分率）。
从图表可以明显看出25℃萌发率相对较高，萌发速率最高，达到萌发率50%时的用时最短。进而说明25℃是最适于褐斑病分生孢子萌发的温度。20℃也相对较适于孢子萌发。15℃时虽然萌发速率最高，达到萌发率50%时的用时也相对较短，但其在48h时的最大萌发率却不是很高，这是否是偶然现象有待于进一步研究。10℃的萌发速率低，达到萌发率50%时的用时也相对较长，但其在48h时的最大萌发率却相对较高。5℃和30℃根据结果可以认为其不适于孢子萌发。
（2）24h各温度芽管的长度测定的试验结果分析。
24h时的芽管长度的显著性分析
从图中可以看出20℃的孢子在24h的芽管长度最长，25℃次之，其他依次为15℃、10℃、5℃、30℃。各处理间差异显著。也就是说各温度对芽管长度的影响力均不同。从而说明温度是影响孢子萌发的力强弱的主要因素。
3、结论与讨论
由此可以得出苹果褐斑病分生孢子的萌发温度范围为5℃～30℃，当温度超过这一范围，分生孢子仍能萌发，但萌发概率就很小了，分生孢子萌发的最适温度为25℃。本实验还可用于指导实践，结合当地气候条件能够明确苹果褐斑病菌越冬病叶上的分生孢子大部分是在越冬后形成及其开始产孢、大量产孢的大体时间和条件，再加上苹果褐斑病分生孢子萌发的时间条件，我们便可以推测褐斑病的发病情况。
然而在测不同温度下24h时孢子萌发出的芽管长度的分析中，20℃时的芽管长度最长，其余依次为25℃、15℃、10℃、5℃、30℃。各种温度间差异显著。其分析结果与萌发率不同，萌发时间早的芽管长度反而不是最长的。其原因可能与代谢有关，温度高代谢速率快，体内营养物质消耗快，温度高的分生孢子内的营养物质在这时相对匮乏，不能提供足够的满足生长的营养物质。这只是推测其真实性还有待研究。
参考文献
[1]杨宝祥.苹果褐斑病在不同苹果品种上感染程度的灰色综合评：43-44.
[2]和青山，袁锋印，两种苹果早期落叶病比较及褐斑病防治建议.西北园艺，2008.06：22.
[3]李保华.苹果褐斑病的发生与控制.国家现代苹果产业技术体系技术简报第54期，2008.
[4]董金皋.农业植物病理学（北方本）.北京：中国农业出版社出版，2001，261-263.
