摘要 采用荧光RT-PCR方法，于2011年对上海市奉贤区13个养禽场和3个野鸟栖息地等相关环境中的H5亚型禽流感病毒的存在状况开展了针对性调查，结果均为阴性，表明奉贤区禽流感防控措施得当、到位。
关键词 环境；H5亚型禽流感病毒；病原学监测；上海；奉贤区
中图分类号 S855.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2012）20-0289-01
禽流感（avian influenza，AI）是由A型禽流感病毒（AIV）所引起的一种急性和高度接触性传染病，几乎所有的野生和家养禽类都可感染该病。禽流感病毒血清亚型众多，由H5和H7亚型引发的高致病性禽流感（HPAI）一旦暴发，就会给养禽业带来毁灭性打击。奉贤区是上海市禽类养殖数量最多和养殖品种最全的畜牧大区，为了对该区相关环境中AIV的存在现状进行调查和分析，并探究飞抵上海的候鸟等野生鸟类在传播禽流感病毒中的作用，于2011年对该区13个养禽场和3个野鸟栖息地等相关环境开展了针对H5亚型禽流感病原学的调查，从而为在该区全面落实禽流感防治工作提供技术支持和决策依据，现将调查结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 试验材料
禽流感H5亚型荧光RT-PCR诊断试剂，来源于深圳匹基生物工程股份有限公司。
1.2 试验方法
1.2.1 采样方法。①禽类交易市场。于2011年定期采集奉贤区3个禽类交易市场活禽喉肛棉拭样品、禽笼棉拭样品以及部分禽粪便和饲料样品，样品数量共190份。②规模化养禽场。于2011年4月和11月，分2次对奉贤区13个养禽场内孵化厅、鸡舍、储蛋库、蛋壳、蛋箱等环境进行棉拭样品的采集，样品数量共425份。③野鸟自然栖息地。根据奉贤区候鸟的品种和数量、主要自然栖息地等情况，选定采样地点。于2011年5—12月共采集了奉贤海塘、海湾国家森林公园、奉贤滨湖区3个野生鸟类栖息地的586份野生鸟类的新鲜粪便样品。
1.2.2 荧光RT-PCR检测H5亚型禽流感病毒。所有样品送往上海市动物疫病预防控制中心，按国标《H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法（GB/T 19438.2—2004）》规定的操作程序进行。
2 结果与分析
采用荧光RT-PCR方法检测样品中的H5亚型禽流感病毒，经对3个禽类交易市场活禽群的不同受检样品的检测，结果均为阴性，结果见表1。
经荧光RT-PCR对3个野鸟自然栖息地586份野鸟新鲜粪便样品的检测，所有样品无Ct值且无扩增曲线，结果均为阴性。
经荧光RT-PCR对13个养禽场环境中棉拭样品的检测，所有样品无Ct值且无扩增曲线，结果均为阴性，具体结果见表2。
3 结论与讨论
（1）2004年初上海市南汇区发生H5亚型高致病性禽流感疫情后，该市高度重视禽流感的防控工作，开展了对所有禽类实施H5亚型禽流感疫苗的免疫接种，加强对禽类批发交易市场的定期休市消毒并不开放水禽交易，强化禽群的禽流感免疫抗体监测。通过以上措施的落实，迄今上海市未再出现新的禽流感疫情。经对奉贤区禽类批发市场、规模养禽场和野鸟自然栖息地等相关环境中H5亚型禽流感病原学检测，均未检出阳性样品，证明当地动物防疫监督部门积极贯彻农业部和市行政主管部门的有关要求，严密布置和落实禽流感的各项综合防控措施，强化免疫力度和监管力度，禽流感得到有效控制，取得了明显的社会效益和经济效益，保障了动物源性食品的安全卫生与市民的身心健康。
（2）禽流感病毒在外界环境中存活能力较差，只要消毒措施得当，常用消毒剂均能将其有效杀灭。但值得注意的是，禽流感病毒极易发生变异，尤其是H5亚型AIV，已在哺乳动物中逐渐变得更具致病性和抗性，能在环境中多生存几天。野鸟是流感病毒的天然宿主，在H5亚型HPAI的传播中具有重要的生态学意义。世界上不少学者都发表了从野鸟中分离到H5亚型AIV的研究报道[1]，2005年我国青海湖中的斑头雁发生大批死亡，经我国学者检测，证实病原体是H5N1亚型AIV[2]。因此，对野鸟传播H5亚型禽流感病毒尤其需要警惕和高度关注。
（3）近几年来，由H5亚型禽流感病毒引起的高致病性禽流感在世界各地肆虐，疫情此起彼伏[3]，给养禽业造成了毁灭性打击，并已经在世界范围内导致数百人感染致死，对人类的身心健康构成了极大威胁[4]，引发了公共卫生事件。由于上海市是活禽及其产品的主销区，流通量大；加之该市仍圈存数量庞大的禽类，其中水禽饲养量比较大，且大多采取沿河水养的传统饲养模式；同时上海市又是野鸟的迁徙地之一，每年有100万羽左右的野鸟飞临该市，这些因素都给高致病性禽流感的防范带来不小的隐患。因此，持续和规范地开展对禽流感的流行病学监测，可为高致病性禽流感的全面防控提供切实保障[5-10]。
4 参考文献
[1] 卢受晟，谌小平.近年全球野生鸟类禽流感病毒的监测结果分析[J].广东畜牧兽医科技，2005，30（3）：6-7.
[2] CHEN H，SMITH G J，ZHANG S Y，et al.Avian Flu：H5N1 virus outbreak in migratory waterfowl[J].Nature，2005，436（7048）：191-192.
[3] ALEXANDER D J.Report on avian influenza in the Eastern Hemisphere during 1997-2002[J].Avian Dis，2003，47（S3）：792-797.
[4] GUAN Y，POON L L，CHEUNG C Y，et al.H5N1 influenza：a protean pandemic threat[J].Proceedings of the National Academy of Science of the United States，2004，101（21）：8156-8161.
[5] 杨其明，肖仁荣，陈仕平，等.禽流感免疫抗体监测分析评估[J].畜牧与与饲料科学，2009（6）：72-73.
[6] 马萍，刘霞，冉隆仲，等.咸宁草海适徒候鸟及周边地区家禽禽流感监测[J].养禽与禽病防治，2012（2）：5-7.
[7] 刘坤洋.H9N2亚型禽流感流行状况及防控[J].畜牧与饲料科学，2012，33（7）：116-117.
[8] 李莹，吴秀山，张成林，等.动物园鹦鹉鸟类H5N1禽流感疫苗免疫后效果鉴测[J].野生动物，2012，33（4）：216-220.
[9] 李清竹，曹明慧，姜新.辽宁省低致病性禽流感（H9亚型）带毒情况调查研究[J].现代畜牧兽医，2012（6）：31-32.
[10] 李生涛.禽病防治[M].2版.北京：中国农业出版社，2008.
