[摘要] 目的 探讨患者外周血细胞膜上CD55和CD59缺陷对阵发性睡眠性血红蛋白尿（paroxysmal nocturnal hemoglobinuria，PNH）的诊断价值。 方法 采用流式细胞术对CD55-PE及CD59-FITC标记的患者外周血中性粒细胞和红细胞进行检测。对2009年1月～2012年3月来我院就诊的13例PNH患者、13例再生障碍性贫血（aplastic anemia，AA）、21例骨髓增生异常综合征（myelodysplastic syndromes，MDS）患者、12例缺铁性贫血（irondeficient anemia，IDA）患者与同期80例健康体检者进行回顾性分析。 结果 PNH患者中性粒细胞及红细胞膜表面CD55、CD59较AA、MDS、IDA及健康体检者均明显下降，差异有统计学意义（P 0.05）。见表1，图1～4。
表1 PNH、MDS、AA、IDA组与Normal组血细胞CD55、CD59阳性率（%）
注：P1：A与B、C、D和E比较；P2：B与C比较；P3：B与D比较；P4：B与E比较
3 讨论
PNH是一种特殊的获得性造血干细胞克隆性疾病。近年来的研究证实，位于X染色体上的磷脂酰肌醇聚糖-A（PIG-A）基因发生体细胞水平的突变[3]，α1-6-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶功能受到影响，进而糖基化磷脂酰肌醇（GPI）合成障碍，导致血液细胞膜表面多种锚定蛋白缺失，如衰变加速因子（CD55）和反应性溶血膜抑制物（CD59），这些可以抵抗补体作用的补体调节蛋白的缺失是导致PNH发病的关键所在。发生PIG-A基因突变的造血干细胞再分化和分裂过程中具有增殖优势而形成的具有体细胞突变和GPI锚定蛋白缺失为特征的细胞群，简称PNH克隆[4]。PNH患者必然存在PNH克隆，但PNH克隆也存在于其他骨髓增殖异常疾病。再生障碍性贫血（AA）、骨髓增生异常综合征（MDS）等骨髓增生异常疾病患者体内也可检测到PNH克隆的存在，因此这也是导致PNH与AA具有某些相似症状的原因[5，6]。 本文通过对59例贫血患者外周血细胞CD55、CD59阳性表达率检测，表明PNH患者CD55、CD59阳性表达率明显降低，尤其是在中性粒细胞膜上，其CD55阳性率仅约为52.5%，CD59阳性率约为56.4%，但在红细胞中其阳性率分别为67.3%和71.8%。提示患者中外周血中性粒细胞CD59缺陷细胞比例高于红细胞。有学者认为粒细胞寿命短，更新快，测定值主要反映自身造血产出细胞的情况，受输血影响小，其表面CD59的表达较为稳定，因而外周血中性粒细胞CD59的表达更能反映骨髓中PNH克隆的情况。而在AA患者中可见其也有CD55、CD59的缺失，有个别患者阳性率<95%，但不超过90%，提示疾病可能有进行性变化，有PNH克隆细胞的存在，但仍以正常细胞为主。MDS患者的外周血细胞中CD55、CD59有缺失，其中可见有5例患者缺失率<95%，1例<90%，提示患者存在PNH克隆细胞，今后有概率发展为PNH或PNH-MDS综合征，有待进一步观察。
综上，流式细胞术检测患者外周血细胞CD55、CD59可作为PNH诊断指标，但在AA、IDA、MDS患者细胞上均有不同程度的改变，与曹文俊[7]报道结果一致。因而对于AA、MDS有着一定的监测意义，故建议把流式细胞术检测红细胞与粒细胞膜的CD55、CD59的表达作为PNH的早期诊断检测项目，并作为PNH、AA、MDS患者长期监测指标之一，对于其临床诊断与预后都有着极其重要的应用价值。
[参考文献]
[1] 王永才. 血液骨髓细胞检验学[M]. 大连：大连出版社，1995：2-10.
[2] 张志南.血液病诊断及疗效标准[M]. 第2版. 北京：科学出版社，1998：88-96.
[3] 俞秋兴，单卫民，朱永新，等. AA、MDS、PNH患者CD55、CD59检测的临床价值[J]. 临床检验杂志，2002：175-176.
[4] 谭齐贤. 临床血液学和血液检验[M]. 北京：人民卫生出版社，2003：149-150.
[5] Azenishi Y，Ueda E，Machii T，et al. CD59-deficiant blood cel1s and PIG-A gene abnormalities in Japanese patients with aplastic anaemia[J].Br J Haematol，1999，104：523-529.
[6] Dunn DE，Tanawattanacharoen P，Boccun IP，et al. Paroxysmal nocturnal hemoglobinuria cells in patients with bone marrow failure syndromes[J].Ann Intern Med，1999，131：401-408.
[7] 曹文俊. CD55/CD59缺陷检测及其在阵发性睡眠性血红蛋白尿诊断中的意义[J]. 诊断学理论与实践，2004，3（6）：416-419.
（收稿日期：2012-06-25）
