【关键词】 马红球菌；PCR测序 doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.671 文章编号：1004-7484（2012）-08-2955-02
马红球菌（Rhodococcus equi）主要对动物治病（马、猪、牛），被认为是人类少见的机会致病菌。近年来，人类马红球菌感染的报道逐渐增多，尤其发生于免疫受损的人群。今年四月我院儿科收治了一位2岁患儿，“间歇性咳嗽、发热20余天入院”，血培养阳性，最后经南方医院检验科PCR测序证实为马红球菌感染，现将该患儿的诊治过程，血培养分离鉴定过程报告如下：
1 患者资料
1.1 简要病史 患儿，男，1岁，20余天前无明显诱因出现咳嗽，伴有间断性发热，最高体温40.2℃，曾在外院就诊，诊断为支气管炎，予以头孢美唑、阿奇霉素针剂、氨溴索静脉滴注，期间病情有好转几天，但停药后咳嗽症状又加重，仍有反复发热。于当日因“间歇性咳嗽、发热20余天”由门诊抱送入院。自起病以来，患儿精神、睡眠欠佳，大小便正常。后用阿奇霉素联合头孢曲松，稍有好转，体温仍有波动，38左右，偶有咳嗽。到家属被告知血培养阳性，目前治疗疗程未到时，家长表示已了解病情，坚决要求出院，随签字患儿出院。
1.2 查体 T39.8，P135次/分，R50次/分，Wt7Kg，咽部充血，扁桃体I度肿大，双肺呼吸音粗，肺底可闻及细湿性啰音，心、肝脾正常。
1.3 辅助检查 血清肺炎支原体抗体阴性，血常规：WBC26.7*109/L，N82.1%，L10.7%。X线检查：双肺纹理增多，模糊，右中下肺大片状模糊阴影，密度不均匀，边缘模糊。血培养阳性，API CORYNE鉴定为低分辨率红球均属。
2 检查方法
2.1 血培养分离鉴定
2.1.1 标本采集 严格无菌操作抽取患儿静脉血3mL，无菌注入双向培养瓶，及时送往检验科微生物室37培养。
2.1.2 培养观察、鉴定
2.1.2.1 37℃培养第三天，双向培养基固相有大小0.5-1mm、不透明、圆形菌落生长，液相微浑浊。革兰氏染色镜检为G+杆菌，细菌形态呈多形性。随转种哥伦比亚血平板、伊红美兰平板37℃纯培养，24小时后，血平板上出现大小0.5-1mm、灰色、不透明、湿润如水迹样菌落，革兰氏染色镜检为G+球菌。此时双向培养基里的培养物革兰氏染色镜检多为G+球菌。37℃培养48小时后血平板上的菌落颜色变为深黄色，粘稠度增加。
2.1.2.2 转种伊红美蓝、巧克力平板均不生长，转种普通营养平板生长良好。
2.1.2.3 触酶阳性，氧化酶阴性，通过API CORYNE板条鉴定出低分辨率红球均属%ID 59.3 T0.86。
生化反应：硝酸盐还原+、碱性磷酸酶+、比嗪酰胺+、七叶灵（水解）-、明胶-、不分解任何的糖类、用金黄色葡萄球菌做CAMP-。
2.1.3 PCR测序结果如下：
GGGAGGAGTCGGATACTGGGCGTAAGAGCTCGTAGGCGGTTTGTCGCGTCGTCCGTGAAAACTTGGGGCTCAACCCCAAGCTTGCGGGCGATACGGGCAGACTTGAGTACTGCAGGGGAGACTGGAATTCCTGGTGTAGCGGTGAAATGCGCAGATATCAGGAGGAACACCGGTGGCGAAGGCGGGTCTCTGGGCAGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGTAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGGCGCTAGGTGTGGGTTTCCTTCCACGGGATCCGTGCCGTAGCTAACGCATTAAGCGCCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGTGGATTAATTCGATGCAACGCGAAGAACCTTACCTGGGTTTGACATATACCGGAAAGCCGTAGAGATACGGCCCCCCTTGTGGTCGGTATACAGGTGGTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGTCCTGTGTTGCCAGCGCGTAATGGCGGGGACTCGCAGGAGACTGCCGGGGTCAACTCGGAGGAAGGTGGGGACGACGTCAAGTCATCATGCCCCTTATGTCCAGGGCTTCACACATGCTACAATGGCCGGTACAGAGGGCTGCGATACCGTGAGGTGGAGCGAATCCCTTAAAGCCGGTCTCAGTTCGGATCGGGGTCTGCAACTCGACCCCGTGAAGTCGGAGTCGCTAGTAATCGCAGATCAGCAACGCTGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACGTCATGAAAGTCGGTAACACCCGAAGCCGGTGGCCTAACCCTTGTGGAGGGAGCCGTCGAAGGTGGGATCGGCGATTGGGACGAGTCGTACAGGCAGCCCAAATATAAA。
2.2 药敏试验 棒状杆菌没有药敏板条，马红球菌还没有药敏标准，用ATB STAPH 2（00）板条做的药敏24小时和48小时结果见下表：
3 结果
3.1 根据其血培养新鲜菌落为G+杆菌，形态具有多形性，陈旧培养物为G+球菌，在血平板培养48小时后，菌落颜色变深黄，生化反应触酶+、硝酸盐还原+、氧化酶-、不分解任何糖类，API CORYNE鉴定结果以及抗生素敏感试验，都与刘玲梅等和叶东方、伍伟国报道的马红球菌生物特性相符。在普通营养平板、血平板上生长良好，而在伊红美蓝、巧克力平板上不生长。现在还未见有马红球菌在巧克力平板上生长的文献报道。本菌株在巧克力平板上是不生长，是共性还是个性，因病例太少不能说明。 3.2 经过PCR测序，也证实该菌为马红球菌。
3.3 患儿咳嗽、发热，血清CRP106.37mg/L，WBC26.7*109/L，N82.1%，说明存在细菌感染，此时血培养阳性与临床症状相符；李庆，刘祥泉，赵禾，等报道的马红球菌的治疗疗程与感染个体的免疫情况、感染部位和病程长短有关，5-60天不等[4]，患儿在院外、院内都用了阿奇霉素和头孢类药物，病情有所好转，但仍有体温波动、间断咳嗽，而马红球菌对红霉素、左氧氟沙星、万古霉素敏感，对青霉素耐药，所用阿奇霉素属敏感药物，但因为在外院是间断用药、在本院疗程太短患儿家长就要求出院，疗程不够疗效自然不明显，患儿血清肺炎支原体抗体阴性，肺X线出现大片模糊阴影，这与马红球菌对肺泡吞噬细胞持续破坏[2]相吻合；该患儿1岁，Wt7Kg，其免疫状态加大了其被感染的机会，以上说明血培养阳性菌就是该患儿的致病菌。
综上所述，该患儿感染了马红球菌。
4 讨论
现文献报道的马红球菌的感染主要是有免疫损伤、免疫缺陷的人群，仅有少数病例属于免疫功能正常的患者[5]，该病例是位免疫力低下的小儿。所以，在临床工作中，对于免疫力低下人群的肺部感染，也要考虑到马红球菌感染的可能；而临床微生物检验工作中遇到新鲜培养物为G+杆菌，形态具有多形性，陈旧培养物为G+球菌，在血平板培养48小时后，菌落颜色变深黄，生化反应触酶+、氧化酶-，就要考虑马红球菌的可能，应快速报出药敏结果，以便指导临床选择有效抗菌药物，对患者进行足够疗程的有效治疗。另外，对于痰液标本，因菌较杂，应将平板培养48-72小时，再观察菌落呈色变化，以防漏检。
参考文献
[1] 刘玲梅，崔龙秀，金凤玲.血培养中马红球菌的分离和鉴定.兰州医学院学报，1996，22（1）：53.
[2] 叶东方，伍国伟.艾滋病患者并发肺部马红球菌病九例临床分析.中华临床感染病杂志，2008，1（4）：235-236.
[3] 刘志远，刘贵建，潘健，等.马红球菌致老年女性肺部感染一例.中华临床医师杂志，2011，5（1）：301-302.
[4] 李庆，刘祥泉，赵禾，等.中西医结合治疗马棒状杆菌感染38例.中国中西医结合杂志，1998，18（2）：91.
[5] 王敬之.革兰氏阳性杆菌的鉴定//李仲兴，郑家齐，李家宏.诊断细菌学.香港：黄河文化出版社，1992：214.
